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核酸染料要怎么用?用的時候要注意些什么?
點擊次數:9199 更新時間:2020-12-15
  核酸染料的機理是通過靜電吸附與DNA分子結合,從而大大增加了DNA的發光。它的熒光信號強,背景低,不同于強效EB,毒性較低,使用更安全。雙鏈DNA在透射的紫外線下顯示綠色熒光,可用于RNA染色。激發波長分別為268m,294mm和491nm,前兩種是紫外光,后者是可見光。發射波長在530nm處產生。
 

核酸染料

  核酸染料的使用方法:
  1、在微波爐中融化100m瓊脂凝膠溶液(濃度通常為0.8%?2)。
  2、加入2-5ul,并輕輕搖動以免產生氣泡。
  3、冷卻至不燙手時倒入凝膠,瓊脂糖凝膠*固化后,加載樣品進行電泳。
  4、電泳完成后,使用可疑的凝膠成像系統或可見光透射儀進行觀察。如果您使用可疑的凝膠成像系統拍照,則可以通過調節照明設備,曝光時間并選擇合適的光片來獲得清晰的圖像和低背景的照片。
  核酸染料的注意事項:
  1、膠水的厚度不應超過0.5cm,膠水太厚會影響檢測的靈敏度。
  2、瓊脂凝膠的反復融化可能會影響核酸檢測的靈敏度。
  3、當通過凝膠電泳回收DNA時,建議在自然光下進行染色和切割DNA譜帶,以避免紫外線和EB對目標DNA的損害,這可以顯著改善分子生物學的下游水平,例如作為克隆,轉化和轉錄。
  4、對皮膚和眼睛有一定刺激性。操作時請戴手套。如果不小心觸摸皮膚,則應立即清洗并正確處理廢物。
  
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